抗生素,简单来说就是一种能“打败”细菌的药物。在与细菌感染的漫长斗争中,人类研发出了各式各样的抗生素,而氨基糖苷类抗生素,无疑是其中的“明星选手”。从1944年链霉素被发现,开启了氨基糖苷类抗生素的时代,到如今,它在呼吸、泌尿等多系统感染治疗中发挥着关键作用。

氨基糖苷类抗生素是一类抗需氧革兰氏阴性杆菌,假单胞菌属,结合杆菌属和葡萄球菌的抗生素,可分为天然存在和人工半合成两大类。天然存在的包括链霉素、新霉素、妥布霉素、大观霉素、卡那霉素、庆大霉素等,人工半合成的主要包括阿米卡星、奈替米星等。此类抗生素结构上的共同特点是由氨基环醇与氨基糖通过氧桥连接成苷类抗生素,溶于水,含有多羟基,多氨基的亲水性化合物,且结构中不含有生色团,这就给日常质量监控工作带来了如何分离和如何检测这双重挑战。
赛默飞的应用科学家团队,使用Vanquish系列液相,结合新型的质量型通用检测器-电雾式检测器(CAD)以及赛默飞的Acclaim AmG C18色谱柱,开发了针对各类氨基糖苷类抗生素的完整解决方案,可以非常轻松地解决氨基糖苷类抗生素分析工作中的分离和检测两大难题,为日常质量控制提供了可靠耐用的分析手段。
电雾式检测器(Charged Aerosol Detector; CAD)是赛默飞一款新型的质量型通用检测器,它灵敏度高,重复性好,线性范围宽,对非挥发和半挥发的化合物均有良好响应,为无紫外吸收和弱紫外吸收化合物的液相分析提供了新的利器,是UV检测器的黄金搭档。

电雾式检测器(CAD)
(上:Corona Veo系列,下:Vanquish CAD系列)
赛默飞Acclaim AmG C18色谱柱,采用聚合物包裹技术, 耐用性好,性能稳定,即使是在极低的pH值条件下,色谱柱流失率也非常低,是氨基糖苷类化合物以及碱性化合物的方法开发首选。

Acclaim AmG C18色谱柱
接下来我们来看一下常见的几种氨基糖苷类抗生素的检测结果。
1 硫酸新霉素

新霉素对照品色谱图
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乳膏样品中新霉素的测定结果
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新霉素的主要成分—新霉素B和新霉素C峰形佳,分离度远大于1.5,样品中新霉素C和B均不受干扰,可轻松进行新霉素各组分的定量分析。
2 硫酸庆大霉素

庆大霉素对照色谱图
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乳膏样品中硫酸庆大霉素的测定结果
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庆大霉素的主要成分C1、C1a、C2、C2a峰形好,分离度大于1.5,样品中庆大霉素各组分均不受干扰,非常有利于庆大霉素各组分的定量分析与研究。
3 硫酸安普霉素

系统适应性结果(点击查看大图)

定量限结果
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安谱霉素与附近杂质的分离度良好,非常有利于安谱霉素的定量分析与研究。
4 妥布霉素

系统适应性结果
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定量限结果
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妥布霉素样品测试结果
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美国药典委员会于2023年1月发布的征求意见稿,其中建议采用HPLC-CAD方法检测妥布霉素的有关物质和含量情况。相较于公示方法推荐的色谱柱,赛默飞Acclaim AmG C18峰型及分离度均更佳。
更多详情可参见AN_20075_HPLC《高效液相色谱法-电雾式检测器测定乳膏中的新霉素》、AN_23051_HPLC《HPLC-CAD法检测妥布霉素有关物质和含量的研究》、AN_C_LC-38《HPLC-CAD测定庆大霉素C组分》、PS21429-EN 0620《Acclaim AmG C18 column,Rugged reversed-phase column designed for aminoglycoside antibiotics analysis》